使用柱层层析硅胶时的几个技巧

    柱层层析硅胶制造商小编带您了解相关知识：硅胶分析的分离原理是根据硅胶上物质的吸附力，一般大物质容易被硅胶吸附，弱物质不易被硅胶吸附，整个分析过程是吸附.解吸.再吸附.再解吸过程。离子交流层析、凝胶过滤层析和亲和层析是三种分离混合物的经典层析技术。
    使用柱层层析硅胶时的几个技巧:
1.硅胶的应用

    刚开始做柱层分析的时候，很容易把柱子安装得又长又短，有时候还会有很多硅胶残留浪费硅胶，主要是因为没有掌握硅胶等固定相的使用量。柱层分析中使用的硅胶一般为100-200目，100毫升硅胶质量约为47克。如果安装直径2.8厘米的柱子，可以安装高度18厘米。

2.使用洗脱剂
    洗脱剂可通过薄层分析确定，一般通过待分离样品确定Rf值为0.2-0.3.选择的洗脱剂应使两种相邻物质Rf价值差异很大化。不要认为在板上爬高分离效果更好，如果假设在板上爬高分离效果更好，Rf在0.6.即使相差为0.2，也不容易在柱上分离。柱分析硅胶制造商认为，由于柱是一个反复爬行的过程，可以通过公式进行比较：0.6／0.8次分离，肯定不如(0.2／0.3)三次方或四次方大。
    乙酸乙酯：石油醚系统；甲醇：氯仿系统；甲醇：水：正丁醇：醋酸系统；尾部可加入少量氨或冰醋酸。对于难以分离的化合物，一是增加柱的长度和直径，二是降低洗脱剂的性能，使混合物分离良好。
3.柱层硅胶柱分析技巧
    柱层分析的装柱非常重要，装柱的效果会直接影响分层分析的分离效果。有两种方法：湿柱和干柱。湿柱非常简单，应用广泛，即先用比固定剂多两倍的洗脱剂将固定相活成均匀浆，先用脱脂棉塞住柱底，再倒入洗脱剂将脱脂棉中的气泡赶出。
处理方法为：（1）固定相必须增强；（2）必须使用更多的溶剂“走柱子”。