层析硅胶一些心得
常说的过柱子应该叫柱层析分离：也叫柱色谱。我们常用的是以硅胶或氧化铝作固定相因硅胶略带酸性，只能用于对酸不敏感的化合物的分离。常用300-400目的柱硅胶或H另：因吸附剂的比表面较大：天气潮湿时或长期放置中吸附的水分会对分离效果产生极酸和碱>醇、胺、硫醇>酯、醛、酮>芳香族化合物>卤代物、醚>烯>饱和烃3.柱子可以分为：加压：常压：减压。压力可以增加淋洗剂的流动速度：减少产品收集的时间，但是会减低柱子的塔板数。所体会：过柱时是否加压要具体分析，通常情况下直径比较粗的柱子用常压即可，因其横减压柱能够减少硅胶的使用量，感觉能够节省一半甚至更多，但是由于大量的空气通过从理论上讲应该是粗长的好。柱层层析硅胶长了：相应的塔板数就高。柱子粗了：上样后样品的的吸附柱。由于柱分离的经验成分太多，所以下面我就几年来过柱的体会写些心得，希望能有所帮助。
1.吸附剂
常用的吸附剂有氧化铝、硅胶、氧化镁、碳酸钙和活性炭等：吸附剂一般要经过纯化和活性处理：颗粒大小应当均匀。对吸附剂来说粒子小、表面积大：吸附能力就高：但是颗粒小时：溶剂的流速就太慢：因此应根据实际分离需要而定。供柱色谱使用的氧化铝有酸性、中性和碱性3种。酸性氧化铝是用1%盐酸浸泡后：用蒸馏水洗至氧化铝的悬浮液pH为4：
用于分离酸性物质；中性氧化铝的pH约为7.5，用于分离中性物质；碱性氧化铝的pH约为10，用于胺或其它碱性化合物的分离。硅胶。若化合物的R值相差较大：则可考虑使用200-300目硅胶以加快层析速度。大的影响(相当于大大增加了固定相的极性导致样品分不开)，因此应将吸附剂放入90~
100度烘箱内烘2小时后：取出在干燥器中冷却后再使用。使用的硅胶：不用时一定要密封：防止吸潮。TLC所用的硅胶板一定要保存在干燥器里面， 或使用前在红外烘箱里干燥一段时间。
2.溶质的结构与吸附能力的关系
化合物的吸附性与它们的极性成正比，化合物分子中含有极性较大的基团时，吸附性也较强：氧化铝对各种化合物的吸附性按以下次序递减：
以其他条件相同的时候，常压柱是效率高的，但是时间也长，比如天然化合物的分离，一个柱子几个月也是有的。加压柱是一种比较好的方法：与常压柱类似，只不过外加压力使淋洗剂走的快些。压力的提供可以是压缩空气：双连球是常用的手动加压的方法。特别是在容易分解的样品的分离
中适用。压力不可过大：不然溶剂走的太快就会减低分离效果。个人觉得加压柱在普通的有机化合物的分离中是比较适用的。截面积的缘故淋洗剂的流速已足够快。通常控制柱子下端液体流速大约在0.5~1滴每秒的范围比较合适。硅胶会使溶剂挥发(有时在柱子外面有水汽凝结)，以及有些比较易分解的东西可能得不到：而且还必须同时使用水泵抽气(很大的噪音：而且时间长)。一般不推荐使用。
4.柱子的尺寸
原点就小(反映在柱子上就是样品层比较薄)，这样相对的减小了分离的难度。试想如果柱子十厘米：而样品就有二厘米：那么分离的难度可想而知，恐怕要用很低极性的溶剂慢慢冲
了。而如果样品层只有0.5厘米：那么各组分就比较容易得到完全分离了。当然采用粗大的柱子要牺牲比较多的硅胶和溶剂了，不过这些成本相对于产品来说也许就不算什么了。
