降香檀叶的非黄酮类成分研究
降香檀(DalbergiaodoriferaT.Chen)为豆科(Leguminosae)黄檀属乔木，原产海南，见于白沙、东方、乐东和崖县，又名海南黄花梨。其心材红褐色，木质坚硬，纹理清晰，有光泽，干燥后不变形、不开裂，耐湿耐腐蚀，并有独特的香气，是制作家俱和工艺品的优质材料；还供药用，称降香，
收载于我国药典中，有化瘀止血，理气止痛之功效，用于吐血，衄血，外伤出血，肝郁胁痛，胸痹刺痛，跌扑伤痛，呕吐腹痛[1–2]。因乱砍滥伐，现存降香檀数量少，是珍稀红木树种，为二级保护植物。在我国华南地区有种植，但由于该树种生长极其缓慢，成材需数十年乃至上百年时间。降香檀叶近革214热带亚热带植物学报第27卷
质，卵形或椭圆形，叶长15~25cm，有淡淡的香味，可再生，资源丰富，值得开发利用。降香檀心材的化学成分主要为挥发油类和黄酮类，含量约为3.79%和2.50%。挥发油成分主要为橙花叔醇、2，4-二甲基-2，4-庚二烯醛、氧化石竹烯、2，4-二甲基-2，6-庚二烯醛、蒎烯、金合欢醇等，以橙花叔醇含量高[3]。黄酮类成分已报道了90多个化合
物，包括黄酮、异黄酮、二氢黄酮、二氢异黄酮、黄烷、异黄烷、新黄酮、查尔酮、紫檀素、双黄酮、Xanthone等结构类型，以异黄酮类为主[4–8]。此外，降香檀心材中还报道了17个倍半萜类、6个芳基苯唑呋喃类、2个木脂素类、2个脂肪酸类和1个烷基酮类化合物[4–6]。降香檀叶的挥发油成分主要有2-甲氧基-
4-乙烯基苯酚、棕榈酸、苯酚、2-甲基-6-羟基喹啉和17个低含量成分等，与心材相比，种类和含量都有明显差别[3，9]。降香檀叶中的黄酮类成分仅报道了鹰嘴豆芽素A(biochaninA)、染料木素(genistein)、鸢尾黄素(tectorigenin)、樱黄素(prunetin)和6-羟基鹰嘴豆
芽素A(6-hydroxybiochaninA)共5个异黄酮类，其他类型化合物未见报道[10–11]。本文报道从降香檀叶中分离得到的1个单萜、2个大柱香波龙烷糖苷、3个芳基糖苷、1个烷基糖苷和1个嘌呤类的结构(图1)，这些非黄酮类化合物均为首次从该植物中报道。1材料和方法1.1材料试验材料于2015年12月采自广东省湛江市麻
章区华仁黄花梨种植专业合作社，由科学院华南植物园叶华谷研究员鉴定为降香檀(DalbergiaodoriferaT.Chen)叶。青岛谱科分离材料公司柱层析硅胶(100~200目)；烟台江友硅胶开发公司薄层色谱(TLC)HSGF254硅胶板，先紫外显色，再喷洒硫酸-乙醇烤热显色；利穗科技(苏州)公司中压色谱柱[填料Chromatorex
C18SMB100，粒径20~45μm，内柱长400mm，内径(i.d.)25mm]；Cosmosil公司5C18-MS-II色谱柱(5μm，分析用250mm×4.6mmi.d.，制备用250mm×20mmi.d.)；GEHealthcareBio-SciencesAB公司葡聚糖凝胶LH-20。1.2仪器和试剂
利穗科技(苏州)公司EZPurifier100中压液相色谱(MPLC)仪；岛津公司LC-6AD液相色谱(HPLC)仪和RID-10A示差检测器；北京创新通恒科技公司LC3000HPLC仪和UV3000检测器；应用生物系统公司MDSSCIEXAPI2000LC-MS/MS联用仪，电喷雾(ESI)电离源；Bruker公司Ascend500
核磁共振(NMR)仪，化学位移值(δ，ppm)以溶剂峰为参照。提取用乙醇为食用级，萃取和柱层析用氯仿、正丁醇、甲醇为分析纯，液相色谱用甲醇和乙腈为色谱纯。1.3提取和分离新鲜降香檀叶在50℃鼓风烘干，粉碎。取粉末2700g，用95%乙醇浸泡3次，溶剂体积依次为13.5、10.8和10.8L，每次浸泡2d，不时用棍棒搅
动，放出溶液，过滤，减压浓缩至干，得乙醇提取物357g。滤渣加水10.8L，煮沸0.5h，抽滤，滤液减压浓缩至4.5L。将乙醇提取物溶于水煮液中，倒入分液漏斗，用氯仿萃取4次，每次3L，合并萃取液，用无水硫酸钠脱水，减压浓缩至干，得氯仿萃取物141g。水溶液用正丁醇萃取5次，每次3L，合并萃取液，脱水，减压浓缩至干，得正丁醇萃取
物167g。取正丁醇萃取物165g，用甲醇溶解，加入硅胶200g，拌匀，减压抽干溶剂，倒出，研磨，过40目筛。取硅胶3300g，用氯仿搅匀，倒入层析柱中，缓慢放出溶剂，用纸筒敲打柱壁，至硅胶面不再下降为止。倒入样品，敲实，层析柱内径11.8cm，硅胶高度78.1cm，柱体积8536mL。依次用氯仿(18L)、
氯仿-甲醇混合液[95∶5，27L→9∶1，24L→85∶15，32L→8∶2，25L→75∶25，40L→7∶3，26L→6∶4，17L，V/V(下同)]、甲醇(10L)洗脱，收集洗脱流份，每份1L，减压浓缩至干，TLC检查，合并主点相同的流份，得组分DLB1~DLB23。DLB6(1.42g)经
MPLC分离，以甲醇-水梯度洗脱，流速10mLmin–1，流份经TLC检查，合并为亚组分DLB6-1~DLB6-6。DLB6-2经凝胶柱分离，用甲醇洗脱，洗脱物经HPLC纯化，以甲醇-水(18∶82)为流动相，流速6mLmin–1，得化合物1(保留时间tR=61.1min，8mg)。DLB8(1.62g)经MPLC分离，以甲醇-水梯度洗脱，流份
经TLC检查，合并为亚组分DLB8-1~DLB8-19。DLB8-10经凝胶柱分离，以甲醇洗脱，洗脱物经HPLC纯化，以乙腈-水(15∶85)为流动相，流速7mLmin–1，第2期吕玲等：降香檀叶的非黄酮类成分研究215得化合物3(tR=107.0min，2.6mg)。DLB9(2.08g)经MPLC分离，以甲醇-水梯度洗脱，流份经TLC
检查，合并为亚组分DLB9-1~DLB9-15。DLB9-2有白色沉淀析出，过滤，得化合物8(12.1mg)。DLB12(6.27g)经MPLC分离，以甲醇-水梯度洗脱，流份经TLC检查，合并为亚组分DLB12-1~DLB12-22。DLB12-3(327mg)经凝胶柱分离，以甲醇洗脱，得化合物7(30.2mg)，DLB12-8(290mg)经凝胶柱分
离，以甲醇洗脱，流份经TLC检查，合并为组分DLB12-8-1~DLB12-8-5。DLB12-8-2经HPLC纯化，以乙腈-水(10∶90)为流动相，流速7mLmin–1，得化合物2(tR=42.0min，27.4mg)。DLB12-8-3经HPLC纯化，以乙腈-水(12∶88)为流动相，流速7mLmin–1，得化合物4(tR=32.5min，17.8mg)。
DLB13(2.87g)经MPLC分离，以甲醇-水梯度洗脱，流份经TLC检查，合并为亚组分DLB13-1~DLB13-16。DLB13-6经凝胶柱分离，以甲醇洗脱，洗脱物经HPLC纯化，以甲醇-水(30∶70)为流动相，流速6mLmin–1，得化合物5(tR=71.1min，18.6mg)。DLB13-7(135mg)经凝胶柱分离，以甲醇洗脱，流
份经TLC检查，合并为组分DLB13-7-1~DLB13-7-5。DLB13-7-2(50mg)经HPLC纯化，以甲醇-水(25∶75)为流动相，流速7mLmin–1，得化合物5(tR=35.6min，3.2mg)。DLB13-8经凝胶柱分离，用甲醇洗脱，洗脱物经HPLC纯化，以甲醇-水(30∶70)
