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柱层层析硅胶色谱分析原理
柱层层析硅胶色谱分析原理
发布日期:2024-04-02 11:27:45
柱层层析硅胶已经成为目前应用更广泛的色谱柱填料,因为它具有优异的机械强度和表面易改性的特点。柱层层析硅胶柱具有柱效高、选择性好、分析速度快的特点,因此广泛应用于药物等分离极性小分子。
在色谱柱中,柱效是两种物质分离能力的大小。高效液相色谱法 (HPLC)柱效测量的高低,不仅反映了填料的性能,而且有时还反映了填料技术的质量。柱色谱法,又称层析法。它是一种以分配平衡为机制的分配方法。柱色谱主要分为两种:吸附柱色谱原理和分配柱色谱原理。
在吸附柱色谱原理中,吸附剂是固定相,洗脱剂是流动相。在进行柱色谱的过程中,混合样品通常添加到色谱柱的顶部,流动相从色谱柱的顶部流经色谱柱,不断从柱中流出。一般来说,吸附剂作用较弱的成分先流出,吸附作用较强的成分后流出。安装柱子前,先将载体与固定液混合,然后分阶段移入色谱柱,用带平面的玻璃棒压紧;试验产品可溶于固定液,与少量载体混合,并添加到预制色谱柱的上端。为了避免洗涤过程中两相分配的变化,洗涤剂需要先与固定液混合使其饱和。
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